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dpph法测抗氧化性实验步骤

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dpph法测抗氧化性实验步骤

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清除DPPH自由基能力的测定

称取一定量的DPPH,用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。分别取2mL不同浓度(2,4,6,8mg/mL)的溶液,加入2mL DPPH溶液,混合均匀,室温放置30min后,5000r/min离心10min。取上清液于517nm处测吸光值。用Vc作为阳性对照。样品对DPPH自由基的清除率用以下公式计算:

DPPH

A0—2mL无水乙醇+ 2mL DPPH溶液的吸光值;

A1—2mL样品溶液+ 2mL DPPH溶液的吸光值;

A2—2mL样品溶液+ 2mL无水乙醇的吸光值。

对Fe2+离子螯合能力的测定

分别取1mL不同浓度(2,4,6,8mg/mL)的溶液和3.7mL蒸馏水,加入2mmol/L的FeCl2溶液0.1mL和5mmol/L的菲洛嗪溶液0.2mL,25℃水浴10min,于562nm处测吸光值。EDTA为阳性对照。样品对Fe2+的螯合率计算公式如下:

Fe2+

A0—1mL蒸馏水代替反应体系中样品溶液后的吸光值;

A1—样品溶液反应后的吸光值;

A2—0.1mL的蒸馏水代替反应体系中O