如何最快速度提取质粒
的有关信息介绍如下:质粒提取是分子生物学中最基本的操作,也是很关键的步骤。因此必须掌握
13000rpm高速离心过夜培养的大肠杆菌(含有质粒)菌液1min
弃掉上清,留菌体,加100ul的溶液I,充分悬浮得到浑浊液
加入200ul的溶液II,轻柔颠倒20次,浑浊液澄清
加入150ul的溶液III,颠倒10次,出现块状白色沉淀
13000rpm高速离心5min,转移上清液到新小离心管中
加入等体积(约300ul)的异丙醇,剧烈混匀,-20℃静置5min
13000rpm高速离心5min,倒掉上清液,加入80%乙醇轻轻洗涤。
13000rpm高速离心1min,倒掉上清。倒扣小离心管于吸水纸上,50℃烘箱中保温5min
加入20ul无菌双蒸水溶解,-20℃冷冻存贮